固定液黏度不宜太高。高效低黏度的液相固定液扩散系数大,反应速度快,色谱色谱柱效能高。高效同时还要选用对紫外光不敏感的液相化合物。常用反相液液分配色谱法的色谱固定液有C18、C8、高效苯己基、液相五氟苯基等;正相的色谱有NH2基、CN基。高效反相键合固定相多为硅烷化键合,液相有单键、色谱三键之分。高效
液液分配色谱法现已广泛采用化学键合固定相。液相它是色谱借助于化学反应合成方法将有机分子以共价键形式,通常为单分子层连接在载体上。化学键合固定相突出的优点是耐流动相冲洗,热稳定性好,在很大程度上减弱了固定相表面的活性位点。现代高效液相色谱法主要使用3类填料制作色谱柱,一是超纯硅胶载体色谱柱,属于高密度键合相,分析对象广泛;二是亲水性化合物专用色谱柱,属于硅胶低密度键合相,适于分离强极性化合物;三是杂化颗粒色谱柱,耐高压,pH 1~12,不仅用于高效液相色谱(HPLC),更适于超高效液相色谱(UPLC)。在反相高效液相色谱法中,农药残留分析广泛使用的固定相是C18。C8也是常用的一种,它更适于分析极性强一些的农药品种,如磺酰脲类除草剂。
手性同定相(chiral stationary phase,CSP)仍然是今后液相色谱法固定相的研究方向,因为约25%的农药品种具有手性对映体,加之手性对映体的活性、降解代谢和残留特点存在着差异。目前商品化的手性色谱柱还难以满足要求,手性固定相有配体交换型固定相、环糊精型手性固定相、高聚物手性固定相、蛋白质手性亲和固定相等。
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